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    大鼠D-乳酸Elisa試劑盒使用說明書

    發(fā)布時間: 2016/1/25  點擊次數(shù): 762次
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    1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復凍融
    2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
    大鼠D-乳酸Elisa試劑盒操作步驟
    1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
    1000μg/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液
    500μg/L 4 號標準品 150μl 的5 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
    250μg/L 3 號標準品 150μl 的4 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
    125μg/L 2 號標準品 150μl 的3 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
    62.5μg/L 1 號標準品 150μl 的2 號標準品加入150μl 標準品稀釋液
    2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
    3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
    4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用
    5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復5 次,拍干。
    6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
    7. 溫育:操作同3。
    8. 洗滌:操作同5。
    9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.
    10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn))。
    11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進行。保存條件及有效期
    1.試劑盒保存:;2-8℃。
    2.大鼠D-乳酸Elisa試劑盒有效期:6 個月

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