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    ELISA試劑盒原理是發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)

    發(fā)布時間: 2018-03-20  點(diǎn)擊次數(shù): 1211次

    ELISA試劑盒原理zui常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定,在去除洗滌過程中的一些非特異結(jié)合上很有用。但它們只在存在時起作用,ELISA試劑盒因為很容易被洗掉。因此Elisa試劑盒原理液中也必須添加封閉液。請勿使用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%)Elisa試劑盒,它會降低特異 結(jié)合,產(chǎn)生假陰性。另一個選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液,后者可協(xié)助洗滌過程中的封閉。
    ELISA試劑盒原理有所不同,是*的。它們與開放位點(diǎn)結(jié)合并封閉,同時穩(wěn)定與微孔板結(jié)合的 抗原分子。常用的Elisa試劑盒包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不過,它的缺點(diǎn)在于Elisa試劑盒能與 Protein A和IgG抗體相互作用。解決這個問題的一種方法是使用雞或魚的正常血清。Elisa試劑盒原理抗體濃度須優(yōu)化。Elisa試劑盒原理留下來的操作步驟,ELISA試劑盒但是如果試劑稍有不同,則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住,非特異的抗體結(jié)合會增加背景。為了防止這一點(diǎn), 切勿使用過多的一抗或二抗。Elisa試劑盒檢測試劑要適量,另一點(diǎn)也很顯而易見:切勿使用過多的檢測試劑。如果濃度過高,或者未正確稀釋,則會導(dǎo) 致高背景。也不要顯色過度,如有必要,優(yōu)化一下何時應(yīng)加入終止液。
    ELISA試劑盒是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術(shù)。此項技術(shù)自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域。Elisa試劑盒原理是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。由于Elisa試劑盒原理的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種Elisa試劑盒孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗結(jié)果 的特異性與穩(wěn)定性。在實際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計,具體的方法步驟可有多種。即:Elisa試劑盒原理用于檢測 抗體的間接法、用于檢測抗原的雙抗體夾心法以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗 原競爭法等等。比較常用的是Elisa試劑盒雙抗體夾心法及ELISA間接法。

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