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    科研試劑盒實驗中緩沖溶液等試劑的配置

    發(fā)布時間: 2013-08-21  點擊次數(shù): 1105次

    ELISA實驗中是以抗原和抗體的免疫反應為基礎,ELISA試劑盒以及各種溶液如何配置?zui近剛做了下ELISA實驗,把各種ELISA配置方法匯總如下:
    (1) ELISA實驗包被緩沖液
    (2) ELISA實驗洗滌緩沖液(2) ELISA實驗洗滌緩沖液
    (3) ELISA實驗稀釋液;
    (4)ELISA實驗終止液
    (5)ELISA底物緩沖液
    (6)ELISA實驗TMB
    (四甲基聯(lián)苯胺)使用液
    (7) ELISA實驗ABTS使用液
    (8)ELISC。

    試劑

    (1) ELISA實驗包被緩沖液(PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液):

    NaHCO3 1.59克

    NaHCO3  2.93克

    加蒸餾水至1000ml

    (2) ELISA實驗洗滌緩沖液(PH7.4 PBS):0.15M

    KH2PO4       0.2克

    Na2HPO4·12H2O  2.9克

    NaCl        8.0克

    KCl         0.2克

    Tween-20 0.05%  0.5ml

    加蒸餾水至1000ml

    (3) ELISA實驗稀釋液:

    牛血清白蛋白(BSA) 0.1克

    加洗滌緩沖液至100ml

    或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。

    (4)  ELISA試劑盒 實驗終止液(2M H2SO4):

    蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。

    (5) ELISA底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):

    0.2M Na2HPO4(28.4克/L) 25.7ml

    0.1M 檸檬酸(19.2克/L)      24.3ml

    加蒸餾水50ml。

    (6) ELISA實驗TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:

    TMB(10mg/5ml無水乙醇) 0.5ml

    底物緩沖液(PH5.5)    10ml

    0.75%H2O2 32μl

    (7) ELISA實驗ABTS使用液:

    ABTS        0.5mg

    底物緩沖液(PH5.5)  1ml

    3%H2O2 2μl

    (8)ELISA實驗封閉液:

    牛血清白蛋白(BSA) 5克

    加洗滌緩沖液至100ml。

    值得一提的是有的封閉液中含有脫脂奶粉,不適合長期保存。

    生物幫推薦 ELISA試劑盒 相關產(chǎn)品,詳情見:封閉試劑、終止溶液、封閉肽、ELISA稀釋液、ELISA試劑盒、ELISA緩沖液、ELISA洗脫緩沖液

    為了保證ELISA實驗的準確性,實驗操作中加入的緩沖液和各組分一定要,將洗滌液加入酶標板中的時候防止加入的試劑混入另外一個酶標孔,嚴防交叉污染。

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